將彗星實驗進行改進以用于DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)作用的檢測。利用甲醛對受試動物肝細胞的影響來判定此法是否適用于檢測DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)。由于在實驗中添加一定量的蛋白酶K,可使單細胞在電泳時產(chǎn)生更大的遷移,因此可以利用添加蛋白酶K前后的彗星尾距比來判斷外來化合物對生物機體產(chǎn)生DNA損傷效應的時候是否有出現(xiàn)DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)作用。結(jié)果表明,該方法快速、經(jīng)濟、靈敏度較高,可以在單細胞水平對甲醛等強交聯(lián)劑引發(fā)的不同組織的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)效應進行檢測,希望該方法能成為指示DNA交聯(lián)能力的有用工具。

DNA交聯(lián)是外來化學物作用于DNA所致的重要遺傳損傷,與其他類型DNA損傷相比,DNA交聯(lián)較難修復或易于發(fā)生易錯修復,在細胞周期中維持時間較長。DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DPC)的存在阻滯了DNA的正常轉(zhuǎn)錄和復制,會導致染色體斷裂、缺失,基因突變和細胞的死亡。因此WHO指出DPC可以作為機體潛在突變的分子標志物。故篩檢環(huán)境化學物的DNA交聯(lián)性損傷具有極其重要的意義。

然而,由于檢測方法的局限,極大地制約了其應用。近年來,國外常有將彗星實驗(Cometassay)用于檢測DNA交聯(lián)的報道,而卻很少見,幾乎都是用KCl-SDS沉淀法進行檢測,但此方法費時且成本較高。本室在深人挖掘彗星實驗的應用前景時,**探討了通過添加蛋白酶K來檢測DNA交聯(lián)的新思路,現(xiàn)報道如下。
 

上海金鵬分析儀器有限公司
電話021-36162366  hongxin86.cn 通過ISO9001：2000認證
以下產(chǎn)品：
核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、紫外分析儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、自動純水蒸餾器、低溫恒溫槽
循環(huán)水真空泵系列、恒流泵系列、自動部分收集器系列、梯度混合儀系列
層析柱系列、溶劑過濾器系列、動物人工呼吸機系列
電熱干燥箱、真空干燥箱、紅外干燥箱、烘干器、培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、振蕩培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、光照培養(yǎng)箱、恒溫恒濕箱、隔水培養(yǎng)箱、人工氣候箱、厭氧培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、箱式電爐、管式電爐、電熱板封閉電爐、萬用電爐、高低溫試驗箱、鹽霧試驗箱、老化試驗箱、調(diào)溫調(diào)濕箱、植物生長箱、分析天平、精密天平、微量天平、電子天平、天平、架盤天平、靜水天平、液體比重天平、電子臺秤、水份測定儀、機械天平、扭力天平、酸度計、電導率儀、溶氧儀離子計、滴定儀、卡氏水分測定儀、工業(yè)在線分析儀、多參數(shù)分析儀、電位儀生物顯微鏡、學生顯微鏡、熒光顯微鏡、金相顯微鏡、體視顯微鏡、讀數(shù)顯微鏡、倒置顯微鏡、計量檢測顯微鏡、羅維朋比色計、余氯比色計、色差儀、折光儀、比色計、旋光儀、濁度儀、白度儀、霧度儀、光澤度儀、恒溫水箱、恒溫水槽、振蕩水槽、油浴油槽、電熱套、防爆冰箱、低溫冰箱、液氮容器、致冷器、精密恒溫、槽粉塵計、恒溫水浴鍋、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、真空泵、電動攪拌器、恒流泵磁力攪拌器、粉碎機、分散乳化均質(zhì)機、振蕩器梯、度混合器、蠕動泵、超凈工作臺、除濕機空氣自凈器、**器、通風柜、可見光分光光度計、紫外可見分光光度計、熒光分光光度計、原子吸收分光光度計、碳硫分析儀、火焰分光度計、氣相色譜、液相色譜、質(zhì)譜儀、色譜相關(guān)設備、氫氣發(fā)生器、氮氣發(fā)生器、氣體發(fā)生一體機、空氣發(fā)生器、層析儀、紫外分析、儀離心機、純水器、收集器、蒸餾水器、顯微(細胞)、、電泳儀、電泳槽、生化分析儀、紫外檢測儀、酶標儀、洗板機、PCR儀、基因槍、導入儀、超聲波細胞粉碎儀、超聲波清洗機